DAPI染色法检测细胞凋亡

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材料与试剂

含0.1%Triton X-100的PBS缓冲液;

DAPI染料(4,6-diamidino-z-phenylindole)100μg,溶于100ml含0.1%TritionX-100的PBS缓冲液中,避光保存。

操作方法

将制备好的石蜡切片按常规脱蜡、水化(按HE染色的脱蜡方法),用PBS洗5min;

或冰冻切片用冰丙酮固定15min,吹干,用PBS洗5min;

或细胞涂片或细胞甩片用0.1%多聚甲醛固定30min,用PBS洗5min;

将以上制备好的片子,浸泡在装有DAPI染液的染色缸中,避光作用10min。

或者直接使用WHB制备好的一步法细胞爬片

用盖玻片封片。

结果判断

置于荧光显微镜下用359nm激发光观察结果:DAPI染色呈蓝白色荧光。早期凋亡细胞呈现核浓缩, 染色加深,或核染色质呈新月形聚集于核膜一边;晚期凋亡细胞表现为核碎裂成大小不等的圆形小体,并被细胞膜所包绕,即凋亡小体。


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